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操作高靈敏elisa試劑盒要注意那些問題？
2021-9-6
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操作高靈敏elisa試劑盒要注意那些問題？1吸取液體時(shí)速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準(zhǔn).2手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后.應(yīng)靜置15～30s,不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染.甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干.3底物為TMB,避免與皮膚相接觸.終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸皮膚.4加樣后及時(shí)放人孵箱,標(biāo)本較多時(shí),要分批操作.按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清... -
酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）實(shí)驗(yàn)操作步驟和注意事項(xiàng)
2021-8-26
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酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）實(shí)驗(yàn)操作步驟和注意事項(xiàng)有哪些呢？本文將為你一一解答。一、實(shí)驗(yàn)方法原理本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體，經(jīng)洗滌后加入含有抗原之待測(cè)樣品，如待檢樣品中有相應(yīng)抗原存在，即可與包被于固相載體上的特異性抗體結(jié)合，經(jīng)保溫孵育洗滌后，即可加入酶標(biāo)記特異性抗體，再經(jīng)孵育洗滌后，加底物顯色進(jìn)行測(cè)定，底物降解的量即為欲測(cè)抗原的量。這種方法欲測(cè)的抗原必須有兩個(gè)可以與抗體結(jié)合的部位，因?yàn)槠湟欢艘挥诠滔噍d體上的抗體作用，而另一端則要與酶標(biāo)記特異性抗體作用。因此，不能...
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如何避免ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的失誤操作
2021-8-19
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ELISA試劑盒有許多試驗(yàn)操作步驟，作為新手難免會(huì)出現(xiàn)操作失誤的時(shí)候。其中許多失誤是因?yàn)槲覀儾蛔⒅丶?xì)節(jié)而造成的。其實(shí)有很多方法可以減少這種失誤，例如在做試驗(yàn)時(shí)少說話，以避免說話時(shí)唾液掉進(jìn)酶的標(biāo)簽中。當(dāng)然，我們也要學(xué)會(huì)找尋自己的問題，找出原因。那么，我們?cè)撊绾伪苊釫LISA試劑盒試驗(yàn)中的失誤呢?1、點(diǎn)評(píng)試劑的實(shí)用性試劑的穩(wěn)定性對(duì)準(zhǔn)確度非常重要。在啟用ELISA試劑盒之前，應(yīng)重復(fù)檢測(cè)陰性和陽性對(duì)照品和樣品，試劑僅在試劑符合要求后才能運(yùn)用。2、操作前仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說明書嚴(yán)...
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認(rèn)識(shí)白介素試劑盒，從這篇文章開始！
2021-8-16
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白介素試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被白介素捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的白介素呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)，計(jì)算樣品濃度。從六個(gè)方面認(rèn)識(shí)白介素試劑盒：1.靈敏度：為試劑檢出被檢物質(zhì)的低量的能力和試劑對(duì)大量樣品中陽性檢出的能力。2.特異性：常用交叉反應(yīng)率表示。...
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elisa實(shí)驗(yàn)中的包被要注意哪些問題
2021-8-12
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通常我們?cè)谶M(jìn)行Elisa試劑盒的實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，需要注意一些問題，例如溫育、顯色、包被等。其中，包被是需特別注意的一個(gè)問題，直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的效果。那么在實(shí)驗(yàn)的時(shí)候包被要注意哪些問題呢？首先我們要知道什么是包被。在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋...
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如何生成更可靠的免疫ELISA表型數(shù)據(jù)
2021-8-5
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ELISA數(shù)據(jù)中雖然表面CD分子仍是用于免疫表型的常用的標(biāo)記，但常規(guī)平行檢測(cè)的CD分子卻有所增加。研究者把其它細(xì)胞表面的蛋白和細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記物加入到免疫表型分析中，已經(jīng)成為標(biāo)準(zhǔn)做法。因?yàn)檫@些進(jìn)展不可避免地使得研究設(shè)計(jì)更加具有挑戰(zhàn)性，我們咨詢了一組專家來幫助您生成更可靠的免疫表型數(shù)據(jù)。研究免疫表型時(shí)，其復(fù)雜性是不同的。從基礎(chǔ)研究到臨床監(jiān)測(cè)，研究者對(duì)這些細(xì)胞進(jìn)行免疫表型分析，有很多原因。Sartorius細(xì)胞分析測(cè)試開發(fā)經(jīng)理MarkCarter指出，免疫表型研究的范圍從識(shí)別單一表型到...
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